všeobecnost
Elektroforéza je technika používaná v laboratorní analýze, která využívá molekulovou hmotnost a elektrický náboj proteinů k vyhodnocení jejich množství a kvality . Tato zkouška umožňuje separaci proteinů do pěti frakcí : albuminu, alfa 1 globulinu, alfa 2 globulinu, beta globulinu a gama globulinu . Změna vztahu mezi těmito typy proteinů indikuje některé patologické stavy. Elektroforéza může být provedena na vzorcích krevního séra, moči nebo jiných biologických tekutinách, jako je likér (cerebrospinální tekutina).
Tento test se také nazývá proteinová elektroforéza nebo protidogramma . Tento test se provádí velmi specifickou metodou: na vzorek se aplikuje elektrické pole, díky kterému se proteiny „seskupují“ podle typu. Ve skutečnosti každý z proteinů, které analyzují elektroforézu, má svou vlastní molekulovou hmotnost a elektrický náboj, který jim umožňuje reagovat na napětí, které je charakteristické přímým proudem. Za normálních podmínek například první očekávaný vrchol - vyšší a užší - v elektroforetické dráze odpovídá albuminu .
Praktičtěji řečeno, elektroforéza je analýza používaná k určení:
- Přítomnost abnormálních proteinů;
- Absence normálních proteinů;
- Pokud je skupina proteinů přítomna v menším nebo větším množství, než je norma.
O elektroforézu může lékař požádat v rámci kontrolních vyšetření (rutinní analýza) nebo diagnostického postupu, tj. V případě, kdy jiné laboratorní analýzy ukázaly změny a je nutné prohloubit nebo potvrdit klinické podezření.
co
Elektroforéza je laboratorní analýza, která poskytuje důležité informace o množství proteinů přítomných v krevním séru nebo v jiných biologických vzorcích a pro každou frakci odhaluje, zda existují anomálie z hlediska kvality. To je možné použitím elektrického pole, využívajícího elektroforetickou mobilitu proteinů; migrace těchto makromolekul je ovlivněna jejich hmotností, velikostí, nábojem a tvarem.
Zejména test umožňuje separaci proteinů do pěti skupin : albumin, alfa 1 globulin, alfa 2, beta a gama .
Výsledek elektroforézy umožňuje zkoumat koncentraci těchto parametrů: možná změna vztahu mezi těmito skupinami proteinů je pozorována během některých patologických stavů. Elektroforéza je proto užitečná při potvrzení diagnózy a po zjištění onemocnění při sledování pacienta v následném sledování .
Elektroforéza: na kterých vzorcích lze provádět vzorky?
Biologické vzorky, na které lze aplikovat elektroforézu, jsou hlavně:
- Sérum : elektroforéza seroproteinu nebo elektroforéza sérových proteinů;
- Moč : močová elektroforéza nebo elektroforéza proteinů v moči;
- Liquor (cerebrospinální tekutina) : elektroforéza bílkovin likéru (poznámka: likér je tekutina, která proniká a chrání mozek, míchu, lebeční nervy a spinální kořeny).
Elektroforéza: co se měří
Plazmatické proteiny jsou velmi důležitými ukazateli: jakékoli změny v jejich koncentracích mohou signalizovat přítomnost řady onemocnění.
S elektroforézou je možné oddělit následující proteiny ve vzorku:
- Albumin ;
- Alfa 1 globuliny ;
- Alfa 2 globuliny ;
- Beta globuliny ;
- Gama globuliny .
V současné době provádí mnoho laboratoří 6-pásmovou separaci, tj. Separaci beta globulinů ve dvou frakcích:
- Beta 1 globuliny ;
- Beta 2 globuliny .
Věděli jste, že ...
V laboratoři je elektroforéza jednou z nejpoužívanějších metod analýzy kvalitativního a kvantitativního složení proteinů. Tato separační metoda je založena na různé rychlosti migrace elektricky nabitých částic, přes roztok a nosné médium, pod vlivem elektrického pole .
Albumin je nejhojnější protein v séru a jeden z nejdůležitějších v těle. To je syntetizováno v játrech a je obsaženo především v intersticiálních tekutinách a v plazmě, kde představuje samo o sobě asi polovinu cirkulujících proteinů. Albumin provádí různé funkce, včetně správného řízení osmotického tlaku a transportu látek, jako je bilirubin.
Globuliny alfa 1 a 2 primárně plní funkce transportu tuků, tuků a hormonů. Beta globuliny také nesou látky přítomné v krvi; Mezi nejznámější proteiny této skupiny patří transferin (používaný k transportu železa) a beta-2 mikroglobulin. Gama globuliny mají místo toho hlavně funkci protilátky.
Některé plazmatické proteiny jsou produkovány játry (jako je albumin), zatímco jiné jsou uvolňovány do krve z buněk, které patří do imunitního systému (gama globulin).
Přečtěte si více: Plazmové proteiny - funkce a funkce »Elektroforéza: základní princip
Úvod : Obecně je elektroforéza separační metodou založenou na různé rychlosti migrace elektricky nabitých částic, roztoku a porézního a inertního nosného média (jako je papír, agarózový gel nebo acetátový list celulózy), pod impulsem elektrického pole. Mnoho molekul biologického zájmu (aminokyseliny, peptidy, proteiny, DNA a RNA) má ve své struktuře ionizovatelné skupiny, a proto jsou při vhodné hodnotě pH přítomny v roztoku jako elektricky nabité druhy. Pod vlivem elektrického pole tyto nabité molekuly migrují směrem ke katodě nebo anodě v závislosti na tom, zda mají kladný náboj ( kation ) nebo záporný náboj ( anionty ).
Elektroforéza je metoda, která umožňuje separaci makromolekul a zejména proteinů na základě:
- Molekulová hmotnost ;
- Elektrický náboj .
Když se proteiny umístí do základního prostředí, chovají se jako kyseliny: skupina COOH různých aminokyselin, které tvoří strukturu makromolekuly, disociuje na COO– (negativní částice) a H + (pozitivní ion). Proteiny jsou tedy načteny jako celek v negativním smyslu a jejich elektroforetická mobilita jde od negativního pólu (katoda) k pozitivnímu, který je směrem k anodě (protože záporné náboje převyšují kladné náboje).
Vrácení se k vyšetření, pacientův vzorek - obsahující směs proteinů (např. Sérové proteiny) - je umístěn na elektroforetický proužek, tj. Na podporu migrace .
Separace v pěti pásmech je získána použitím elektrického pole generovaného stejnosměrným proudem, které umožňuje migraci různých proteinových frakcí na základě jejich hmotnosti a jejich elektrického náboje.
Výsledek - nazvaný ELECTROPHORETIC TRACK - je složen z různých píků a křivek, na které odpovídají proteinové frakce, děleno typem a množstvím, přítomným ve zkoušené kapalině:
- Obvykle je první vrchol, vyšší a užší, vrchol ALBUMINY ;
- Dále pozorujeme vrcholy GLOBULINŮ, mnohem nižší než albumin.
Zvýšení nebo snížení amplitudy a intenzity píků, které se tvoří v dráze, indikují větší nebo menší přítomnost proteinů v každé kategorii.
Věděli jste, že ...
Transthyretin byl dříve nazýván prealbumin díky jeho větší elektroforetické mobilitě ve srovnání s albuminem, což mu umožňuje migrovat do více anodické polohy.
Další informace: Prealbumin - Co je to »Proč to běží
Co je to elektroforéza?
Elektroforéza se používá k diagnostice nebo monitorování nemocí, které mají mezi svými klinickými nálezy změnu koncentrací proteinů v plazmě, moči nebo jiných biologických vzorcích.
Tato anomálie může nastat například v případě:
- Nemoci jater a ledvin ;
- Infekce nebo záněty ;
- Mnohočetný myelom ;
- Skleróza multiplex .
Elektroforéza: kdy je vyšetření předepsáno?
ÚVOD : v kontrolních panelech je obvykle obsaženo celkové množství bílkovin v krvi - proteinémie - a albumin - albuminemie, a proto se často používá při hodnocení zdravotního stavu osoby . V rutinní analýze může být změna těchto parametrů považována za BELL ALARMU a může vyvolat prohloubení klinického obrazu, zejména pokud pacient vykazuje určitou symptomatologii.
Elektroforéza PROTEIN IN SERUM může být předepsána:
- V případě, že jiné laboratorní testy poskytují abnormální výsledek, pokud jde o nepřítomnost nebo menší a větší množství plazmatických proteinů s ohledem na normu;
- Když přítomnost:
- Probíhající zánět;
- infekce;
- Autoimunitní onemocnění;
- nefropatie;
- onemocnění jater;
- Nemoci charakterizované produkcí monoklonální složky, tj. Protilátek se stejnou identickou chemickou strukturou, jako jsou:
- Mnohočetný myelom a jeho varianty;
- Waldenströmova makroglobulinémie;
- Amyloidóza.
Když je v moči vysoká koncentrace bílkovin, může lékař požádat o provedení elektroforézy URINÁRNÍCH PROTEINŮ . Vyšetření umožňuje určit zdroj změny, potvrdit nebo podpořit diagnózu.
Elektroforéza PROTEIN DEL LIQUOR může být předepsána při podezření na diagnózu roztroušené sklerózy . V tomto případě je charakteristika elektroforetického vzoru charakteristická, protože zdůrazňuje přítomnost takzvaných oligoklonálních pásů, které nejsou běžně přítomny v elektroforéze sérových proteinů.
Jakmile je nemoc diagnostikována, může být v pravidelných intervalech prováděna elektroforéza:
- Sledujte nemoc v průběhu času, pak sledujte její průběh (sledování);
- Zkontrolujte účinnost terapeutického protokolu .
Normální hodnoty
U dospělého v dobrém zdravotním stavu je normální koncentrace celkového proteinu v krvi 6, 4-8, 3 gramů na jeden deciliter plazmy (g / dl).
Albumin (seroproteinová elektroforéza)
Albumin představuje 59-69% celkových plazmatických proteinů.
- Referenční hodnota Albumin: 3, 6-4, 9 g / dl
Alfa 1 globulin
Alfa-1 globuliny tvoří 2, 0-3, 5% celkových plazmatických proteinů.
- Referenční hodnota alfa 1 globulin : 0, 2-0, 4 g / dl
Alfa 2 globuliny
Alfa-2 globuliny představují 6 až 11% celkových plazmatických proteinů.
- Referenční hodnota alfa 2 globuliny : 0, 4-0, 8 g / dl
Beta globuliny
Beta globuliny tvoří 6-12% celkových plazmatických proteinů.
- Referenční hodnota Beta globulinu: 0, 6-1 g / dl
Gama globuliny
Gama globuliny tvoří 9-20% celkových plazmatických proteinů.
- Referenční hodnota Gama globulin : 0, 9-1, 4 g / dl
Poznámka : referenční interval zkoušky se může mírně lišit v závislosti na věku, pohlaví a přístrojovém vybavení používaném v analytické laboratoři. Z tohoto důvodu je vhodnější konzultovat rozsahy uvedené přímo ve zprávě. Je také třeba mít na paměti, že výsledky analýz musí být hodnoceny jako celek praktickým lékařem, který zná anamnézu pacienta.
Vysoké hodnoty - příčiny
Sérová elektroforéza: co způsobuje zvýšení hodnot?
bílkovina
Nález s nárůstem sérového albuminu s elektroforézou je častý během morbidních stavů, které odečítají vodu z těla a vedou ke vzniku dehydratace, včetně:
- Trvalé zvracení a průjem;
- Rozsáhlé popáleniny;
- Nadměrné pocení;
- Addisonova choroba;
- Diabetická kóma.
Při elektroforetickém sledování může být koncentrace albuminu vyšší, než je normální, indikativní pro:
- Sarkoidóza (systémové zánětlivé onemocnění);
- Buergerova choroba nebo tromboangioit obliterans (onemocnění postihující cévy a tepny).
ALFA 1 GLOBULINE
Alfa 1 globuliny se zvyšují v následujících případech:
- Probíhající zánětlivý proces nebo infekce;
- Srdeční infarkt;
- Užívání antikoncepční pilulky;
- Těhotenství.
ALFA 2 GLOBULINE
Vysoké hodnoty alfa 2 globulinů mohou indikovat přítomnost:
- Onemocnění ledvin;
- Zánět nebo probíhající infekce;
- Srdeční infarkt;
- diabetes;
- Downův syndrom;
- Některé zhoubné nádory.
BETA GLOBULINE
Zvýšení beta globulinů v elektroforetické stopě indikuje:
- Vysoký cholesterol v krvi (hypercholesterolémie);
- Anémie z nedostatku železa;
- Některé případy mnohočetného myelomu;
- Těhotenství.
GLOBULINE RANGE
V elektroforéze může být zvýšení polyklonálních gama globulinů spojeno s:
- Chronická zánětlivá onemocnění;
- Některé nemoci imunitního systému;
- Revmatoidní artritida;
- Systémový lupus erythematosus;
- Chronická onemocnění jater (jako je hepatitida a cirhóza);
- Akutní a chronické infekce.
Vysoké hodnoty monoklonálního gama globulinu mohou místo toho indikovat přítomnost:
- Některé nádory;
- Mnohočetný myelom;
- lymfom;
- Waldenströmova makroglobulinémie.
Pro identifikaci, který gama globulin je přítomen v monoklonálním pásmu v elektroforetickém vzoru, je možné pokračovat s imunofixací.
Elektroforéza v moči
Významné zvýšení proteinů v moči pomocí elektroforézy může indikovat poruchu glomerulů a renálních tubulu .
Kapalná elektroforéza
Pokud elektroforéza vede k tomu, že proteiny, které nejsou normálně přítomny v mozkomíšním moku, nebo jsou zvýšené, může dojít k zánětu, infekci nebo jiným onemocněním nervového systému .
Nález oligoklonálních pásů v elektroforetickém sledování je indikátorem roztroušené sklerózy .
Nízké hodnoty - příčiny
Sérová elektroforéza: co způsobuje redukci proteinu?
bílkovina
Redukce albuminu v elektroforetickém sledování může být způsobena všemi těmito stavy charakterizovanými:
- Podvýživa (zejména: nedostatek bílkovin v důsledku sníženého příjmu potravy);
- Sekundární malabsorpce : enteropatie, celiakie, Crohnova choroba, intolerance proteinů;
- Zvýšený katabolismus : těžký zánět, febrilní stavy, kachexie, novotvary, hypertyreóza, hyperkortizolismus atd.
Vrcholy albuminu také snižují následující patologické stavy, které ovlivňují játra (chybí schopnost syntézy) a ledviny (zvyšuje eliminaci).
Koncentrace albuminu detekovaná sérovou elektroforézou se může snížit, zejména pokud jsou stanoveny:
- Jaterní cirhóza (je nejčastější příčinou);
- Akutní a chronická hepatitida;
- Genetické anomálie (syntéza vadných albuminů);
- Onemocnění ledvin (zejména nefrotický syndrom a glomerulonefritida).
Nález nízkého albuminu s elektroforézou je také pozorován v těhotenství pro:
- Hormonální modifikace, které mění vaskulární permeabilitu a funkčnost mnoha orgánů těhotné ženy;
- Zvýšené používání proteinů plodem.
ALFA 1 GLOBULINE
Alfa 1 globuliny jsou redukovány na elektroforézu v přítomnosti:
- Těžké jaterní onemocnění;
- Vrozený emfyzém;
- Onemocnění ledvin.
ALFA 2 GLOBULINE
Nízké hodnoty alfa 2 globulinů mohou indikovat:
- podvýživa;
- Těžké jaterní onemocnění;
- Hemolýza.
BETA GLOBULINE
Snížená koncentrace beta globulinů ve stopě elektroforézy může indikovat:
- podvýživa;
- Jaterní cirhóza.
GLOBULINE RANGE
Nízké hodnoty gama globulinu mohou indikovat přítomnost různých onemocnění imunitního systému.
Elektroforéza v moči
Normálně, malá koncentrace bílkoviny v moči je nalezená s elektroforézou. Tento výsledek tedy nenaznačuje přítomnost některých onemocnění.
Kapalná elektroforéza
Za normálních podmínek je koncentrace celkových proteinů v likéru velmi nízká. Zjištění hodnot snížených na elektroforézu tedy nekoreluje s určitým patologickým významem.
Jak se provádí
Elektroforéza: z čeho se zkouška skládá
- Syrovátková elektroforéza (krevní test) : pro získání elektroforetického sledování na séru je nutné podstoupit jednoduchý vzorek krve ze žíly paže. Následně se sérum získá oddělením frakce obsahující buňky od kapalné.
- Elektroforéza proteinů v moči (analýza moči) : je nutné odebrat malé množství moči do speciální sterilní nádoby. Na základě údajů lékaře a laboratoře lze vzorek odebrat bez přesného načasování ( náhodně ) nebo do 24 hodin .
- Kapalná elektroforéza (analýza mozkomíšního moku) : vyžaduje odběr malého množství tekutiny, a to vložením jehly, do dutiny páteře ( lumbální punkce ).
příprava
Elektroforéza: je nutná příprava?
- Před odběrem krve mohou některé laboratoře vyžadovat, abyste pozorovali rychlou dobu nejméně 10-12 hodin. Během této doby je povoleno malé množství vody.
- Elektroforéza může být prováděna na moči odebrané v určitý den (náhodně) nebo během 24 hodin, takže je nutné předem získat vhodné sterilní nádoby.
- Co se týče kapalné elektroforézy, není nutná žádná speciální příprava.
Co může změnit výsledek zkoušky?
Některé léky mohou ovlivnit výsledek elektroforézy, proto je vhodné informovat lékaře o probíhajících terapiích. Léky, které mohou změnit klinický nález zahrnují orální kontraceptiva, anabolické steroidy, androgeny, růstové hormony, inzulín a antibiotika.
Mezi další faktory, které mohou ovlivnit zkoušku, patří:
- Hyperlipidemie (přítomnost mnoha tuků v krvi);
- Podávání velkých množství intravenózních tekutin;
- Vegetariánská strava;
- Hemolyzované vzorky (pokud se provádí elektroforéza na séru).
Interpretace výsledků
Metoda elektroforézy se vyhodnocuje v kombinaci s výsledky dalších analýz a poskytuje informace o zdravotním stavu pacienta.
Snížení nebo zvýšení ve srovnání se standardem proteinů v sérových, močových nebo kapalných elektroforézách ukazuje přítomnost různých onemocnění, identifikovaných na základě parametru ovlivněného změnou.
Vždy je třeba mít na paměti, že referenční hodnoty se mohou měnit z jedné laboratoře do druhé. Proto je nezbytné konzultovat s lékařem primární péče nebo s referenčním odborníkem výsledky, které budete číst a interpretovat.
