Co je to antibiogram?
Antibiogram je mikrobiologický test, který se používá k testování citlivosti mikroorganismu na jeden nebo více antimikrobiálních léčiv.
Antiogram je využíván hlavně na hygienické úrovni a tradičně se provádí na vzorcích bakteriálních kolonií odvozených z jednotek odebraných hltanovým, uretrálním, rektálním nebo vaginálním výtěrem, nebo izolovaných ze stolice, moči nebo vzorků sputa.
Výkonné techniky a antibiotická rezistence
Antibiogram je často prováděn agarovou difuzní metodou, také označovanou jako Kirby-Bauerova technika.
Během procedury se vzorek bakterií odebere z kolonií a osadí (vhodně zlikviduje) na příslušnou půdu, do které se také vloží disky nasáklé antibiotiky ve známých koncentracích (podle terapeutických potřeb). Destička se potom umístí do inkubátoru a po předem stanoveném časovém období (např. 18 hodin při 35 ° C) je možné ocenit relativně rovnoměrný mikrobiální růst, s více nebo méně širokými halo v okolí papírových podbradníků. Na základě rozsahu těchto inhibičních oblastí se hodnotí citlivost bakterie na každé jednotlivé testované antibiotikum: pokud je průměr velký, mikroorganismus je citlivý na léčivo (S), zatímco pokud je malý, bakterie má střední citlivost (I nebo MS), zatímco pokud je zkoumaný bakteriální druh zanedbatelný nebo dokonce chybí, je rezistentní vůči léčivému přípravku. Pro přesné stanovení citlivosti bakterií se měří průměr inhibičních halo v mm, přičemž se porovnávají hodnoty získané se standardními hodnotami bakteriálního kmene.
Jak zabránit rezistenci vůči antibiotikům
Antibiotika nejsou účinná proti virům; Typickými virovými infekcemi jsou nachlazení, chřipka, laryngitida, bronchitida, záď a většina bolestí v krku (faryngitida).
Použití antibiotik, pokud nejsou potřebné (například na nachlazení nebo chřipku), může vést k rozvoji rezistence na antibiotika (bakterie jsou „rezistentní vůči antibiotikům“, pokud nemohou být antibiotikem zabity).
POZNÁMKA: je to bakterie, která je rezistentní na antibiotikum, nikoliv na jednotlivce. Proto, i když jste nikdy neužívali antibiotika, můžete se vyvinout infekce způsobené bakteriemi rezistentními na antibiotika.
Aby se zabránilo vzniku rezistence na antibiotika, je nezbytné dokončit terapii předepsanou lékařem; i když se cítíte dobře zastavit antibiotika předčasně.
Když se během antibiogramu spojí svatyně sousedních kotoučů, příslušná antibiotika se považují za synergická.
Jako alternativa k právě popsané metodě může být antibiogram také prováděn na kapalném médiu, které po inkubaci vyhodnotí zákal odpovídající různým stupňům ředění léčiva (viz níže).
Antibiogram se nyní stal základním testem vzhledem k nyní rozšířenému šíření fenoménu rezistence na léčiva. Volba nesprávného antibiotika nebo použití širokospektrého léku, aby se zabránilo tomuto postupu, může ve skutečnosti vybrat bakteriální kmeny rezistentní vůči působení stejného antibiotika. V článku věnovaném tomuto tématu jsme viděli, jak byla tato kapacita původně získána pro spontánní mutace a následně přenesena na další bakterie. Není tedy náhoda, že objev a klinické využití mnoha antibiotik šly ruku v ruce s výskytem bakterií rezistentních vůči jejich působení. Velmi často se jedná o nevhodné a přehnané užívání těchto léků, například k vyléčení virových infekcí, proti kterým se ukázaly jako zcela zbytečné (jediným možným ospravedlněním je zabránit všem bakteriálním superinfekcím u ohrožených osob).
Dva velmi důležité parametry odvozené z antibiogramu jsou MIC a MBC:
- MIC (minimální inhibiční koncentrace; minimální inhibiční koncentrace): je to nejnižší koncentrace zkoušené sloučeniny nezbytná pro inhibici růstu daného mikroorganismu.
- MBC (Minimum Bacterial Concentration): je nejnižší koncentrace zkoumané sloučeniny, která je nezbytná k vyvolání smrti více než 99, 9% dané mikrobiální populace.
Pro posouzení MIC v pevném médiu pomocí antibiogramu se předpokládá, že mikrobiální činidlo difunduje z disku do agaru a vytváří koncentrační gradient; v důsledku toho, čím dále od disku, tím nižší je koncentrace léčiva, která postupně klesá, aby dosáhla kritické koncentrace (minimální přibližná inhibiční koncentrace MIC). Za tímto bodem dochází ke konfluentnímu růstu, zatímco v oblasti nejblíže k disku chybí růst.
V antibiogramu na kapalném médiu se připraví série zkumavek obsahujících kultivační médium a ředěných roztoků (v poměru 2) testovaného antibiotika. V každé z těchto zkumavek se naočkuje standardní množství zkoumaných mikrobů; následuje inkubace a vyšetření. Jak bylo očekáváno, v přítomnosti zákalu je růst bakterií viditelný, zatímco roztok zůstal čirý, což znamená úplnou inhibici mikrobiálního růstu, s důrazem na optimální účinnost léčiva. V tomto případě MIC (minimální inhibiční koncentrace) představuje nejvyšší ředění (tj. Nejnižší koncentraci) antibiotika schopného zcela inhibovat růst mikroorganismu. MBC (minimální baktericidní koncentrace) je namísto toho stanovena pěstováním vzorků odebraných z kapalného média ve speciálním pevném médiu a vyhodnocením možného růstu bakterií. MIC tedy bude odpovídat koncentraci antibiotika přítomného v zkumavce, ve které je léčivo zředěnější a které při kulturním vyšetření nevykazuje žádné známky bakteriální aktivity (viz obrázek).
Výsledky antibiogramu jsou zveřejněny ve zvláštní zprávě, kde jsou uvedena antibiotika a související MMC; někdy jsou také uvedena asociace antibiotik, která mohou být použita, a stupeň rezistence mikroorganismů.
Tradiční metody provádění antibiogramu, velmi užitečné pro vzdělávací účely, se neustále vyvíjejí. Dnes jsou například k dispozici automatizované komerční systémy, zatímco papírové podložky mohou být nahrazeny proužky obsahujícími přírůstkové dávky antibiotika, vhodně označené na samotném proužku (E-test na antibiogram).
