ICSI - Intracytoplasmic Sperm Injection

všeobecnost

ICSI (intracytoplazmatická injekce spermií) je lékařsky asistovaná procreation (PMA) technika, která zahrnuje inseminaci oocytu mikroinjekcí jedné spermie přímo do ní.

V této praxi se gamety (oocyt a spermatozoon) setkávají vně ženského těla, takže oplodnění a tvorba jednoho nebo více embryí se odehrávají „ve zkumavce“ (přesněji na kultivační plotně), než všechny uvnitř vejcovodu pacienta.

Následně jsou embrya přenesena do dělohy, kde probíhá implantát, což může mít za následek těhotenství.

ICSI metoda obecně zahrnuje farmakologickou stimulaci vaječníku produkovat více oocytů, následovaný chirurgickým odstraněním stejný (toto je malý zásah volal pick-up ); sběr mužských gamet může být prováděn namísto masturbace, perkutánní nebo testikulární biopsie.

V laboratoři jsou odebrané ženské gamety umístěny na kultivační destičky uvnitř inkubátorů, pak jsou jednotlivé spermie naočkovány mikropipetou přímo do cytoplazmy oocytů.

Pokud jsou oocyty úspěšně oplodněny, embrya jsou přenesena do dělohy transvaginální, ultrazvukem řízenou nebo hysteroskopickou léčbou během 48-72 hodin.

Očekávání ICSI se očekává až poté, co lékař centra PMA vyloučí možnost přirozené koncepce. Tato technika je indikována zejména v případech, kdy je přítomna těžká mužská neplodnost ; ICSI ve skutečnosti umožňuje překonat obtíže s oplodněním, protože jeden spermatozoon je vložen přímo do cytoplazmy oocytů.

Úvodní poznámky

Lékařsky asistované rozmnožování (PMA) pomáhá párům, které si přejí mít dítě, ale nemohou spontánně podstoupit těhotenství. Tuto možnost indikují lékaři jako součást léčebné cesty, v případech, kdy je zjištěna neplodnost alespoň jednoho ze dvou partnerů a neexistují žádné jiné účinné terapeutické metody k vyřešení tohoto stavu.
Světová zdravotnická organizace (WHO) definuje neplodnost jako "neschopnost otěhotnět v páru po 12-24 měsících nechráněných cílených vztahů " (to znamená, že je to během dnů pravděpodobné ovulace).
Asistované hnojení používá různé jednoduché nebo složité techniky, zahrnující manipulaci ženských gamet (oocytů), samců (spermií) nebo embryí. Mezi metody první úrovně patří hormonální stimulace, ultrazvukové monitorování ovulace žen a intrauterinní inseminace (IUI); ten je charakterizován skutečností, že hnojení probíhá přímo v ženském genitálním aparátu. Druhou a třetí úroveň komplexní léčby, na druhé straně, vyžadují, aby hnojení nejprve probíhalo in vitro a zahrnují: IVF (in vitro fertilizace s transferem embryí), ICSI a GIFT (intratubariální přenos gamet). Tyto postupy jsou indikovány, když je neplodnost, která má být řešena, závažná a vyžaduje více invazivních metod, které vyžadují lokální anestézii a / nebo hlubokou sedaci.

indikace

Příčiny, které mohou určit neplodnost, jsou mnohé a mohou záviset na jednom nebo obou partnerech.

Obvykle se technika ICSI doporučuje v případech:

Tubální faktory : vejcovody (dva kanály, které spojují vaječníky s dělohou) mohou být z různých důvodů ztěžovány nebo poškozeny; to brání pojetí (to je setkání semenné tekutiny s vaječnou buňkou) nebo sestup oplodněného vajíčka do dělohy pro implantát. Tubální léze často závisí na zanedbávaných pohlavních infekcích (například chlamydií), ale mohou také pocházet z vrozených onemocnění, pánevní chirurgie nebo předchozí mimoděložní těhotenství .
Mužská neplodnost těžkého stupně : může být způsobena různými stavy, které ohrožují produkci nebo kvalitu semenných tekutin, jako je varikokéla (křečová dilatace žil šourku), kryptorchidismus (selhání nebo neúplný sestup varlat v míchu) a hormonální deficity (např. hypogonadotropní hypogonadismus). Jiné příčiny mohou zahrnovat: chronické infekce, které způsobují abnormální semennou tekutinu nebo způsobují částečné nebo úplné uzavření cévních deferenů, genetické abnormality a imunologické faktory (produkce protilátek proti spermiím mužského organismu nebo partnera).
Selhání léčebného postupu technikou první úrovně, tj. Když lékařsko-chirurgická léčba nebo intrauterinní inseminace nedaly výsledky;
Zmeškané nebo snížené oplodnění v předchozích IVF cyklech (IVF).

Další podmínky, které nutí ICSI, zahrnují:

Nevysvětlená sterilita (to znamená, že nemůžete zjistit zjištěnou příčinu), pokud předchozí léčba (např. Inseminační cykly) nedala výsledky nebo nebyla shledána nevhodnou;
Obstrukční azoospermie (nepřítomnost spermií v semenné tekutině, kvůli překážkám, které zabraňují jejímu vyzařování s ejakulací) a sekreci (nedostatek produkce spermií ve varlatech);
Snížená rezerva vaječníků : nízký počet oocytů ve vaječnících v důsledku rozvoje věku ženy nebo vrozených nebo chirurgických příčin;
Endokrinně-ovulační neplodnost : vaječníky neprodukují oocyty v důsledku příčin hormonálního původu;
Endometrióza : abnormální růst tkáně podobný tomu, který normálně pokrývá vnitřek dělohy (endometrium) v jiných místech; tento stav může způsobit neplodnost, protože často produkuje srůsty vaječníků nebo vejcovodů.
Faktory neplodnosti mužského i ženského pohlaví : současně působí několik příčin, které ovlivňují početí.

Předběžné lékařské vyšetření

Když se pár nedaří navzdory cílenému pohlavnímu styku prokreaci, může být v průběhu 12-24 měsíců indikováno lékařské vyšetření, jehož cílem je ověřit neplodnost alespoň jednoho z partnerů.

Lékař se nejprve setkává s oběma pacienty a sestavuje lékařskou anamnézu na základě své lékařské historie, poté zjistí, zda existují faktory ovlivňující plodnost (např. Sexuální infekce, nadměrná obezita nebo řídkost, protinádorová léčba, kouření, zneužívání alkoholu). atd.) a doporučuje nejvhodnější léčebný postup pro řešení reprodukčního problému.

Nelze-li zvládnout stavy s jinými adekvátními farmakologickými a / nebo chirurgickými zákroky, je-li plození nemožné nebo v každém případě je pravděpodobnost zahájení těhotenství vzdálená (jako např. V případě zkumavek, které nejsou viditelné nebo poškozené, spermie s hodnotami deficitu atd.), lékaři poukazují na použití lékařsky asistovaného procreation. Přijatý postup je obvykle volen na základě příčiny neplodnosti předložené párem.

Diagnostická cesta pro zjištění neplodnosti

V závislosti na profilu páru může specialista PMA centra doporučit specifické testy, aby se vyloučila přítomnost hormonálních dysfunkcí, patologií ovlivňujících dělohu a zkumavek, abnormalit semenné tekutiny a tak dále.

Pro pár

Hormonální dávky (hodnotíme hladiny pohlavních hormonů přítomných v krvi, vyloučíme dysfunkce);
Genetická vyšetření (pro posouzení možných anomálií);
Imunologické testy na přítomnost protilátek proti spermiím.

Pro toho muže

Spermiogramma (vyšetření semenné tekutiny za účelem stanovení její fertilizační kapacity a dalších základních funkcí, jako je počet, morfologie a procento pohyblivých spermií);
Spermiokultura (analýza spermií pro stanovení přítomnosti infekčních agens v pohlavních orgánech).

Pro ženu

Hysterosalpingografie (ke kontrole stavu zkumavek a jejich průchodnosti);
Ultrazvuk dělohy a vaječníků (umožňuje kontrolovat ovulaci, množství oocytů, přítomnost možných cyst, myomů nebo jiných formací);
Hysteroskopie (endoskopické vyšetření děložní dutiny);
Pap test (cytologické vyšetření, které zkoumá přítomnost HPV léze a změny buněk na úrovni děložního hrdla);
Vyhledávání infekčních agens (např. Vaginální výtěr pro detekci běžných patogenů, jako jsou Chlamydia a Candida ).

Jak se to dělá?

Metoda ICSI se používá společně s IVF, s tím rozdílem, že metoda oplodnění oocytu se provádí injekcí jedné spermie do cytoplazmy.

Také v tomto případě se proto setkávání gamet odehrává mimo tělo ženy (tj. Na kultivační plotně). Po úspěšném oplodnění se potom embrya přenesou do dělohy.

Získání oocytů

ICSI lze provádět:

Ve spontánním cyklu (tedy bez jakékoli terapie ovariální stimulací);
S farmakologickou stimulací ovulace způsobuje zrání více oocytů, tj. S indukcí růstu folikulů při současné produkci více ženských gamet podáváním léčiv (denní dávky).

V tomto případě je ovariální odpověď kontrolována:

Monitorování ultrazvukem : série ultrazvukových skenů se provádí přibližně každé dva dny, aby se pozoroval růst folikulů, z nichž budou pocházet oocyty;
Hormonální dávkování : odebírají se vzorky krve pro stanovení sekrece hormonů spojených s růstem folikulů ve vaječníku.

Chirurgický odběr oocytů a jejich odběr

Po stimulaci vaječníků k produkci více folikulů se sbírka oocytů (pick-up) provádí transvaginálním postupem, v lokální anestezii a / nebo hlubokém sedaci. Pod ultrazvukem jsou folikuly "body" s jehlou a vejce je nasáváno do nich. V ICSI technice trvá vpich a aspirační procedura v průměru od 5 do 15 minut, v závislosti na počtu přítomných folikulů.

Spermie se shromažďuje masturbací po 2–3 dnech abstinence ejakulace, ve stejný den jako odběr vajíček. V některých případech se sběr mužských gamet provádí perkutánně nebo testikulární biopsií.

Hnojení odebraných oocytů probíhá ve stejný den odběru.

Hnojení oocytů v laboratoři

Folikulární kapalina se analyzuje pod mikroskopem, aby se izolovaly oocyty, které se přenesou do speciální kultivační kapaliny a uloží do inkubátoru. Současně se připraví vzorek spermatu s výběrem mobilních a vitálních spermií.

Pak pokračujte do svalové a mimotělní kultivace gamet. Technika ICSI je založena na principu "imitace" procesu hnojení manipulací pod mikroskopickým vedením: oocyt je držen na místě skleněnou pipetou a pomocí jehly kanyly je injikován do cytoplazmy jediná spermie.

Produkt této operace je umístěn na speciálních destičkách s kultivačními médii, která dávají buňkám výživu, uvnitř inkubátorů. Tato fáze je velmi citlivá a probíhá pod přísnou kontrolou biologů a embryologů, kteří sledují všechny procesy buněčného dělení, které povedou k tvorbě embrya.

Pokud jde o IVF, 16-18 hodin po inseminaci dochází k oplodnění, tj. K tvorbě zygoty, kde lze pozorovat dva pronukley (samci a samice).

Vývoj embrya a přenos do dělohy

Po 48-72 hodinách se vyberou 1 až 3 embrya a přenesou se do dělohy. Vzorek se zavede do tenkého plastického katétru a gynekolog ho přesměruje na konec dělohy. Zavedení embryí trvá jen několik minut a je obecně bezbolestné.

kryokonzervace

V mezích platných předpisů jsou nepřenesená embrya zmrazena v tekutém dusíku, a proto jsou uložena ve vzorkové bance. Technika ICSI může ve skutečnosti předvídat použití gamet nebo nově oplodněných embryí (" čerstvé cykly ") nebo kryokonzervovaných, které jsou přivedeny a udržovány při velmi nízkých teplotách (" cykly rozmrazování ").

Pokud není těhotenství dosaženo při prvním pokusu, mohou být embrya nebo oocyty dříve kryokonzervované použity pro následné léčebné cykly.

Úspěšnost

Technika ICSI je spojena s vysokým procentem oplodnění s tvorbou embryí (spermatozoon je ušetřen od křížení pellucidní membrány) a má dobrý úspěch v přítomnosti těžké mužské neplodnosti. V případě azoospermie může být technika ve skutečnosti prováděna s použitím gamet přítomných ve varlatech nebo v epididymis, odkud jsou odebírány aspirací nebo mikrochirurgií (podobně jako u biopsie). Jediná podmínka nezbytná pro aplikaci ICSI je ve skutečnosti to, že spermie jsou životně důležité.

Míra úspěšnosti těhotenství je také dobrá (obecně řečeno se odhaduje na přibližně 20% na cyklus). Výsledek léčby závisí na kvalitě embryí přenesených in vitro a na schopnosti dělohy přijímat je.

Rizika a možné komplikace

Reakce na různé terapeutické protokoly pro indukci ovulace musí být kontrolována (ultrazvukem vaječníků a / nebo hormonálních dávek), aby se zabránilo syndromu hyperstimulace vaječníků, tj. Nadměrnému dozrávání folikulů a produkci vajec.
Tento stav může zahrnovat různé příznaky, jako je dušnost, nevolnost a zvětšení vaječníků, které jsou bolestivé a způsobují pacientovi nepohodlí; v nejzávažnějších případech se může vyskytnout abdominální distenze a tvorba krevních sraženin, což by mohlo nutně způsobit hospitalizaci.
Peritoneální infekce jsou jedním z možných důsledků laparoskopických postupů spojených s technikou ICSI, zaměřených na nalezení vaječných buněk.
Dále je nutné oznámit větší pravděpodobnost vícenásobného těhotenství, protože za účelem zvýšení možnosti vzniku koncepce během procesu ICSI může být několik embryí přeneseno do dělohy. Mnohonásobné těhotenství nese rizika pro zdraví matky a dětí, u nichž je větší pravděpodobnost, že se narodí předčasně a budou mít podváhu na konci těhotenství.